Dosages immunologiques

Les laboratoires du groupe SPIRAL réalisent pour vous des dosages immunologiques basés sur des technologies innovantes complémentaires.

  • Les méthodes ELISA sont adaptées pour le dosage d’un nombre limité d’antigènes ou d’anticorps.
  • Les méthodes xMAP® sont adaptées pour le dosage simultané d’un grand nombre d’antigènes.
Dosages immunologiques

ELISA – Quantification d’un antigène (ou d'un anticorps)

La technologie ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent-Assay), a longtemps été une méthode standard pour la détection quantitative d’un anticorps (immunoglobulines IgG, IgM, IgE, IgA, IgD) ou d’un antigène (protéine, polysaccharide…) dans un échantillon. Cette technique nécessite généralement l’utilisation de plaques de microtitration.

  • Dans le cas de l’ELISA directe et de l’ELISA indirecte, l’antigène cible fixé sur le support est mis en contact avec l’échantillon (sérum) contenant l’anticorps à doser. Dans le premier cas l’anticorps est marqué pour permettre sa détection; dans le second cas il est pris en sandwich entre l’antigène et un second anticorps marqué (couplé à une enzyme), dirigé contre le premier. L’ELISA indirect permet d’atteindre une meilleure sensibilité.
  • L’ELISA en sandwich (l’antigène est pris en sandwich entre 2 anticorps) et l’ELISA par compétition (les antigènes de l’échantillon entrent en compétition pour les anticorps spécifiques avec des antigènes marqués) permettent de mesurer la concentration d’un antigène avec une grande sensibilité et une excellente spécificité.
  • La méthode ELISA-sandwich est mieux adaptée pour l’analyse d »échantillons  biologiques complexes (surnageants de culture tissulaire,lysats tissulaires…). La méthode ELISA-compétition est particulièrement adaptée pour le dosage d’antigènes de petite taille, ne pouvant accueillir qu’un seul anticorps à la fois.

Applications de la technique ELISA

Les applications des tests immunoenzymatiques ELISA sont nombreuses.

Agroalimentaire

  • Détection dans les aliments, d’allergènes, d’endotoxines bactériennes, de mycotoxines, d’antibiotiques….
  • Identification des espèces (viande)…

Biologie clinique et animale

  • Mesure de la concentration de molécules antigéniques ou d’haptènes dans  les prélèvements biologiques : biomarqueurs de l’inflammation (cytokines, chimiokines), facteurs de croissance, biomarqueurs du stress oxydatif…
  • Sérologie pour le dosage des anticorps IgG, IgM, IgE…

N’hésitez pas à nous consulter pour toute demande particulière.

Dosage immuno-enzymatique ELISA
Dosage ELISA sandwich
Aliment transformé
Santé animale

Technologie xMAP® – Analyses multiples d'antigènes

La technologie xMAP®  (“Multi-Analyte Profiling”) de la société Luminex® est basée sur l’utilisation de microbilles revêtues d’anticorps spécifiques qui permet la détection quantitative simultanée des multiples antigènes ciblés.

Le multiplexage, obtenu en combinant différents sets de microbilles, permet de doser rapidement jusqu’à 100 analytes à partir d’un faible volume d’échantillon. Les résultats sont parfaitement corrélés avec ceux obtenus avec les méthodes immunoenzymatiques classiques (ELISA).

Applications de la technique xMAP®

Cytokines et Chimiokines (réponse immunitaire, inflammation…)

  • Détection rapide et simultanée d’un nombre important de cytokines et/ou de chimiokines (50) dans des échantillons biologiques (sang, plasma, sérum, tissus…) pouvant être issus de différentes espèces animales (humain, rat, souris…)
  • La plupart des cytokines et chimiokines d’intérêt biologique peuvent être dosées
  • Vous avez la possibilité de sélectionner votre propre combinaison de biomarqueurs ou d’utiliser des combinaisons préétablies, comme par exemple un « panel Inflammation » : E-selectin, GM-CSF, ICAM-1, IFN α, IFN γ, IL-1 α, IL-1 b, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-13, IL17A, IP-10, MCP-1, MIP-1 b, MIP-1 α, P-selectin, TNF α.
  • Les Laboratoires SPIRAL réalisent régulièrement des profils cytokines/chimiokines dans le cadre de prestations de recherche (études précliniques, cliniques…).

La technologie xMAP® permet aussi de doser des antigènes dans les domaine de la santé et de l’alimentation : protéines, peptides, acides nucléiques, saccharides … (nous consulter)

Lire notre article sur les dosages par technologie Multiplex

technologie xmap antigènes
Technologie xMap. Dosage antigénique en mode sandwich
Technologie xMAP Luninex
Technologie xMAP (Luninex.com)

A propos des cytokines et des chimiokines

Les cytokines et les chimiokines assurent la communication entre les cellules intervenant dans l’immunité innée et adaptative. Elles jouent un rôle majeur dans les processus d’inflammation, de cicatrisation et d’hématopïèse. Les cytokines peuvent être classées en cinq familles : interleukines, chimiokines, Tumor necrosis Factor (TNF), interférons (INF) et Colony Stimulating Factors (CSF).

Parmi les principales cytokines dosées par nos laboratoires, on peut citer :

  • l’interleukine-1-béta (IL-1β), l’interleukine-6 (IL-6) et le facteur de nécrose tumorale (TNFα) sont les principales cytokines proinflammatoires de la réponse immunitaire innée
  • l’interleukine-8 (IL-8) est une chimiokine qui favorise la migration des granulocytes vers le site d’infection et stimule la phagocytose
  • l’interleukine-10 (IL-10) favorise la régulation de la réponse immunitaire
  • L’interleukine-12 (IL-12) module l’activation des lymphocytes T, stimule la production de IFN-γ et de TNF-α
  • l’interféron γ (IFN-γ) jouent un rôle central dans la réponse immunitaire adaptative

La concentration des cytokines dans le plasma est très faible (pg/ml) et leur dosage nécessite des technologies analytiques spécifiques ultra-sensibles telles que l’ELISA et le multiplexage. La technologie de dosage par multiplexage permet de déterminer un profil cytokinique pouvant être associé à une situation clinique définie. Nos laboratoires réalisent aussi la détermination du profil cytokinique au niveau des tissus.

Notre équipe se tient à votre disposition pour vous conseiller dans le choix des analyses les plus pertinentes  à réaliser pour répondre à vos problématiques. N’hésitez pas à nous contacter !