Défenses Antioxydantes et Stress Oxydatif
L’équilibre de la balance RedOx est reconnu comme étant un enjeu important pour le bien-être et la santé. Un déséquilibre de cette balance se produit lorsque les défenses antioxydantes ne sont plus suffisantes pour empêcher l’apparition d’un stress oxydatif.
Les laboratoires du groupe SPIRAL ont mis en place un ensemble d’outils pour l’analyse d’échantillons biologiques. Ils ont acquis en particulier une solide expérience dans le domaine de l’évaluation l’état de stress oxydatif et du potentiel de défenses antioxydantes, aussi bien chez l’homme et l’animal que dans les végétaux, les aliments, les boissons, les compléments alimentaires…
Les Laboratoires de Recherches Appliquées SPIRAL ont ainsi développé un test biologique innovant de mesure du potentiel global de défenses antioxydantes : le Test KRL™.
Lire l’article consacré à la balance RedOx et au stress oxydatif
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Analyses de produits
Produits végétaux
Extraits
Analyses de produits
Alimentation
Nutraceutiques
Santé animale
Nutrition
Bien-être
Santé humaine
Nutrition
Bien-être
Nos laboratoires ne réalisent pas d’analyses médicales pour les particuliers
Dosage des antioxydants dans les produits naturels
Profil HPLC d’un extrait de polyphénols
Estimation globale de la teneur en biomolécules antioxydantes d’un extrait naturel (aliment, boisson, complément alimentaire, extrait végétal…) :
Vitamines C et E
Polyphénols totaux
Pigments anthocyanes
Flavonoïdes
Caroténoïdes totaux (xanthophylles et carotènes).
Profil chromatographique des composés phénoliques présents dans un extrait : acides phénoliques, stilbènoïdes (resvératrol), flavonoïdes (flavones, flavonols, flavanones, flavanols, proanthocyanidines, isoflavones, anthocyanes).
Profil chromatographique des pigments anthocyanes dans un extrait
Profil chromatographique des caroténoïdes (carotènes et xanthophylles) d’un extrait.
Lire les articles à propos des polyphénols et des analyses que nous réalisons.
Evaluation des défenses antioxydantes
Le Test biologique KRL™ de mesure de capacité globale de défenses antioxydantes
Test biologique KRL de mesure du potentiel global de défenses antioxydantes. Courbe de mesure de la cinétique d’hémolyse par un générateur de radicaux libres.
Le test KRL™ (Kit Radicaux Libres) est un test biologique de mesure de la capacité globale de défenses antioxydantes.
Le test KRL™, développé dans nos laboratoires, permet de mesurer de façon dynamique la capacité d’un échantillon à protéger des cellules sanguines soumises à une agression par des radicaux libres dans des conditions standardisées. La capacité globale de défenses antioxydantes est donnée par l’augmentation de la durée de résistance à l’hémolyse par rapport à un témoin. Les résultats sont standardisés en équivalents Trolox (équivalent soluble de vitamine E) ou acide gallique (composé phénolique).
L’intérêt du test biologique KRL™ est qu’il tient compte à la fois des défenses extracellulaires, intracellulaires et de la synergie des deux.
Le Test KRL est le test de mesure de la capacité de défenses antioxydantes se rapprochant le plus des conditions in-vivo.
Un test de diagnostic pour l’humain et l’animal
Le test biologique KRL™ est couramment utilisé comme test de diagnostic in-vitro pour mesurer, sur sang total et sur culot d’hématies, la capacité globale de défenses antioxydantes d’un individu (homme, animal).
Le test biologique KRL™ peut aussi être utilisé, dans le cadre d’études
cliniques ou précliniques, pour mesurer le potentiel global de défenses
antioxydantes (ou pro-oxydantes) d’un produit (complément alimentaire,
aliment ou boisson…) ou d’un mode de vie (stress psychologique,
sédentarité, tabagisme…)
Un test pour évaluer in-vitro la capacité antioxydante de produits
Nos laboratoires réalisent régulièrement avec le test biologique KRL™ des mesures de capacité globale antioxydante (ou pro-oxydante) des produits qui nous sont confiés.
Pour en savoir plus sur le Test biologique de défenses antioxydantes KRL™ :
Tests chimiques d'évaluation des défenses antioxydantes ...
Nos laboratoires peuvent réaliser la plupart des tests antioxydants classiques.
Le Test colorimétrique DPPH (2,2-DiPhenyl-1-PicrylHydrazyl) est basé sur la réduction du radical 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH). Les résultats sont exprimés par rapport à une gamme d’antioxydant témoin (Trolox ou acide gallique). Tests sur produits (aliments, compléments alimentaires…) ou sur prélèvements biologiques (plasma, urine…) et lysats cellulaires.
Le test ABTS, aussi appelé test TEAC (Trolox Equivalent Antioxidant Capacity), est un test colorimétrique basé sur la mesure de l’inhibition de l’oxydation de l’ABTS® (2,2’-Azino-di-[3-ethylbenzthiazoline sulphonate]) en ABTS•+ par la métmyoglobine. Les résultats sont exprimés par rapport à une gamme d’antioxydant témoin (Trolox ou acide gallique). Tests sur produits (aliments, compléments alimentaires…) ou sur prélèvements biologiques (plasma, urine…) et lysats cellulaires.
Le FRAP (Ferric Reducing Abitity of Plasma ) est un test colorimétrique basé sur la réduction à pH acide du complexe tripyridyl-triazine ferrique (Fe(III)-TPTZ)). Les résultats sont exprimés par rapport à une gamme d’antioxydant témoin (Trolox ou acide gallique). Test sur prélèvements biologiques (plasma).
Le test ORAC évalue la capacité d’un échantillon à limiter l’oxydation de la fluorescéine, une molécule fluorescente sensible à l’oxydation, par des radicaux peroxyles générés par un composé oxydant thermolabile.
…
Note : ces test chimiques ne permettent pas, au contraire du test KRL™, d’apprécier les systèmes de défenses antioxydantes dans leur globalité.
Mesure d'activité des enzymes antioxydantes
La Superoxyde dismutase (SOD), la glutathion peroxydase (GPx) et la catalase (Cat) sont trois enzymes majeures du système de défenses antioxydantes des cellules. Le dosage de leur activité peut aider à identifier l’origine d’une diminution ou d’une augmentation des défenses globales.
Détermination de l’activité enzymatique de la Superoxyde Dismutase (SOD).
Analyses réalisées sur culot d’hématies, plasma, lysat cellulaire, tissus.
Détermination de l’activité enzymatique de la Glutathion Peroxydase (GPx)
Analyses réalisées sur culot d’hématies, plasma, lysat cellulaire, tissus.
Détermination de l’activité enzymatique de la Catalase (Cat)
Analyses réalisées sur culot d’hématies, plasma, lysat cellulaire, tissus.
Dosage des marqueurs du stress oxydatif
Un stress oxydatif peut apparaître lorsque les défenses antioxydantes s’avèrent insuffisantes pour réguler un flux d’espèces réactives de l’oxygène et de l’azote (ROS et RNS) trop important, ce qui peut être le cas en situation pathologique, à l’occasion d’un évènement inflammatoire, d’un stress.
L’excès de radicaux libres provoque alors ce qu’on appelle un stress oxydatif.
Lire l’article consacré à la balance RedOx et au stress oxydatif
Le MDA (malondialdéhyde) plasmatique est un marqueur de l’oxydation des lipides (plus particulièrement des acides gras polyinsaturés).
La mesure de MDA sur est réalisée par Chromatographie Liquide Haute Performance après réaction avec l’acide thiobarbiturique.
Le 8-isoprostane (8-epi PGF2α) est un marqueur de l’oxydation des lipides (oxydation des phospholipides)
La quantification de 8-isoprostane est réalisée par immunodosage ELISA sur plasma, urine, lysat cellulaire ou tissus.
Le 8-OHdG est un marqueur du dommage oxydatif de l’ADN et de l’ARN.
3 marqueurs sont analysés : 8-hydroxy-2′-désoxyguanosine, 8-hydroxyguanosine, 8-hydroxyguanine. La quantification de 8OHdG est réalisée par immunodosage ELISA sur plasma, urine, lysat cellulaire, tissus ou salive.
Le taux de protéine carbonyle est un marqueur de l’oxydation des protéines.
La quantification de protéine carbonyle sur plasma, urine ou lysat cellulaire est réalisée par réaction avec DNPH (2,4-dinitrophenylhydrazine).
L’association d’un taux de glutathion réduit (GSH) bas avec un taux de glutathion oxydé (GSSG) élevé (rapport GSH/GSSG effondré) est un signe évocateur de stress oxydatif récent. Ce test peut être réalisé sur sang total, suspension d’hématies ou sur d’autres tissus.
Notre équipe se tient à votre disposition pour vous conseiller dans le choix des analyses les plus pertinentes à réaliser pour répondre à vos problématiques. N’hésitez pas à nous contacter !
